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限制性内切酶的作用原理 | 限制性内切酶的特性

1. 限制性内切酶的特性

限制性核酸内切酶

restrictionendonuclease

简称限制性核酸酶。这是一类能从DNA分子中间水解磷酸二酯键,从而切断双链DNA的核酸水解酶。它们不同于一般的脱氧核糖核酸酶(DNase),它们的切点大多很严格,要求专一的核苷酸顺序——识别顺序。长期以来,难以深入研究的DNA大分子,借此可以切割成特定的小片段来分析。限制性核酸酶的发现,为基因结构、DNA碱基顺序分析和基因工程的研究开辟了途径。为此,W.阿尔伯,H.史密斯和D.内森斯三人共同获得了1978年诺贝尔生理学或医学奖。

其实,限制酶、限制性内切酶都一样,都是限制性核酸内切酶的简称。

2. 限制性内切酶的具体应用

限制酶都好用的。

不然也不叫限制性内切酶了。选择限制性内切酶是根据你的序列来决定的,不是根据好不好用决定的。

3. 限制性内切酶的特性及反应过程

一种限制性内切核酸酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且在特定的位点切割磷酸二酯键。

4. 限制性内切酶的特异性

酶切法原理:

限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。可分为三类:

Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子,然后从底物上解离。

Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶(限制酶),它切割某一特异的核苷酸序列; 另一种为独立的甲基化酶,其修饰同一识别序列。

Ⅱ类中的限制性内切酶在分子克隆中得到了广泛应用,它们是重组DNA的基础。绝大多数Ⅱ类限制酶识别长度为4至6个核苷酸的回文对称特异核苷酸序列(如EcoRⅠ识别六个核苷酸序列:5'-G↓AATTC-3'),有少数酶识别更长的序列或简并序列。

Ⅱ类酶切割位点在识别序列中,有的在对称轴处切割,产生平末端的DNA片段(如SmaⅠ:5'-CCC↓GGG-3');有的切割位点在对称轴一侧,产生带有单链突出末端的DNA片段称黏性末端,如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的黏性末端。

5. 限制性内切酶意义

限制性内切酶:可以切割磷酸二酯键DNA连接酶:可以连接被限制酶切割开磷酸二酯键DNA聚合酶:使DNA两链中的H键结合解旋酶:使DNA两链中的H键断开 参考资料: 生物教材~~

6. 限制性内切酶的特性是

限制性内切酶,来自大肠埃希菌属(E. coli),识别位点是:GAATTC。

是一种核酸酶,来自某些特定品系的大肠杆菌(E. coli,也是其名称由来),EcoRI是一种常用的限制酶,可将特定序列的DNA切割成片段,切割后的小片段端点为5'端突出的黏状末端(sticky end)。属于 限制性内切酶Ⅱ类。

7. 限制性内切酶的特征

不是,主要是从原核生物中分离、迄今已从近300种不同微生物中分离出了约4000种限制酶。

8. 限制性内切酶的特性和作用

限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶

9. 限制性内切酶的特性不包括

人体细胞中没有限制性内切酶,是因为人类的细胞中不需要限制,贤内前没来发生作用,而限制性内切酶一般都存在于例如大肠杆菌这些戏之中,而这些细菌具有限制性内切核酸酶的主要作用就是沙,此外界入侵的敌对DNA,而人体的免疫系统已经建立了一套非常完整的免疫机制,因此人体细胞中没有限制性内切核酸酶

10. 限制性内切酶的活性

两者没有明确的换算关系.U/L是有中国特色的一个单位

U-unit,单位。IU-international

unit,国际单位。

酶活力单位U和IU是一样的。

I表示international。国内外大多数临床实验室常省略国际二字,即将IU简写为U。在特定条件下,1分钟内转化1微摩尔底物,或者底物中1微摩尔有关基团所需的酶量,称为一个酶活力国际单位(IU,又称U)。在生物酶中一般用大写字母U表示限制性内切酶的活性单位,原则上是在50μl的反应液中,37°C的温度条件下,经过一个小时反应,将1μgDNA完全分解所需要的限制性内切酶。酶活力大小有2个单位,kat和U。1min内能转化1μmol底物的酶量称为1酶单位(U),1s内能转化1mol底物的酶量为1 katal(简称kat)。

它们的换算如下:1 kat=6*10^7 U,1U=16.67n kat。

扩展资料酶的作用酶的作用主要是催化作用。酶支配着生物的新陈代谢、营养和能量转换等许多催化过程,与生命过程关系密切的反应大多是酶催化反应。酶使人体所进食的食物得到消化和吸收,并且维持内脏所有功能

包括:细胞修复、消炎排毒、新陈代谢、提高免疫力、产生能量、促进血液循环。随着对酶的深入研究和越来越多的认识,富含高浓SOD的复合酶,对疾病的调理上发挥了越来越显著的作用。正常人体内酶活性较稳定,当人体某些器官和组织受损或发生疾病后,某些酶被释放入血、尿或体液内。

酶在生产生活中的应用也很广泛。酶的作用将淀粉等通过水解、氧化等过程,最后转化为酒精;酱油、食醋的生产也是在酶的作用下完成的;用淀粉酶和纤维素酶处理过的饲料,营养价值提高;洗衣粉中加入酶,可以使洗衣粉效率提高,使原来不易除去的汗渍等很容易除去。

11. 限制性内切酶的特性有哪些

限制性核酸内切酶有许多种,但是每一种限制酶都具有专一性,能识别特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点。