1. wb一抗是什么
一般说来,在WB实验中,一抗的抗体是需要与检测蛋白来源不同种属的抗体。二抗的抗体与一抗来源也不同。
比如来源于小鼠细胞表达的蛋白,需要用兔来源或者羊来源的一抗,二抗再针对一抗来选择。而大鼠与小鼠来源比较接近。
所以小鼠WB实验一般不用来源于大鼠的抗体
2. wb中一抗和二抗的作用
TBS 医学上为一种缓释剂,tris buffered saline 的简写。意思为三乙醇胺缓冲盐水溶液 或 triethanolamine buffered saline solution 的简写,意思为 三羟甲基氨基甲烷缓冲盐水。
TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液。
TBST即Tris盐缓冲液(TBS)加入了Tween -20,是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液。TBST作为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可以用于免疫印迹(WB)、免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)和免疫细胞化学(IC)等试验中封闭液的配置、一抗二抗的配置、一抗二抗孵育后的洗涤等,封闭和洗涤可以降低背景,增强信噪比。
3. wb一抗和二抗
钼(Molybdenum)是元素周期表第五周期WB族元素是一种化学元素,元素符号Mo,原子序数42,原子量95.94,是一种灰色的过渡金属。金属呈银灰色,为体心立方晶体结构,熔点2617℃,沸点4612℃,密度10.22g/cm3,第一电离能7.099电子伏特。钼和钨性质十分相似,具有高温强度好、硬度高、密度大、抗腐蚀能力强、热膨胀系数小、良好的导电和导热等特性。
钼的纯金属是银白色,非常坚硬。把少量钼加到钢之中,可使钢变硬。钼是对植物很重要的营养素,也在一些酶之中找得到。在常温下不受空气的侵蚀。跟盐酸或氢氟酸不起反应。化合价+2、+4和+6,最稳定化合物为+6价。
4. wb一抗是什么 IgG
原理是: 一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除ELISA法外,也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。
前两法有“南”和“北”之意,故本法遂被延伸称为Western(西)印迹法,该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。
将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并与第一抗体共孵。
第一抗体专一地与待分离蛋自质的抗原决定簇结合,然后用另一种蛋自质,如135I-蛋白A或辣根过氧化物酶连接的山羊抗IgG检测已结合上去的抗体。
本法所需时间6小时或过夜。
5. WB一抗一般加多少
建议起始浓度1:200开始(当然你也可以1:100,如果你的背景不高的话),倍比稀释,不是再做1:100-1:1000稀释,注意了。其实没有必要分装,一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装,建议原液分装或是10稀释后分装。原液分装。抗体孵育之前稀释。做WB的浓度不一定需要很高的。可以设置简单梯度1:200;1:500;1:1000。看结果再优化
6. wb一抗作用
wb1是数字微安表电子元件。
数字微安表是测量高压电器或绝缘材料等被试品的直流耐压和泄漏电流,是不可缺少的直流电流表。主要为直流高压发生器和高压试验变压器的直流试验配套使用的仪表,是对直流高压泄漏电流测试的仪表工具。
直流耐压中泄漏电流测量,是预防性试验规程中的一项重要的试验项目,而传统的指针式微安表在测量直流泄漏电流时,具有读数误差大,抗干扰能力差,抗冲击电流不能保护等缺点。
7. WB一抗怎么选择
实验原理
WB 是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
与 Southern 或 Northern 杂交方法类似,但 WB 采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,「探针」是抗体,「显色」用标记的二抗。
经过 PAGE 分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达
8. WB 一抗
一般对碳素钢有:抗剪强度≈0.6-0.7倍的抗拉强度45钢强度约600MPa,抗剪强度为370MPa;正火850 ℃+ 淬火840 ℃+ 回火600 ℃的供货状态抗拉强度有600MPa.
1、45钢的剪切强度是178MPa。
2、抗剪强度一般取其抗拉强度的一半,45号钢抗拉强度σs为355MPa。
3、45钢是GB中的叫法,也叫“油钢”。是常用中碳调质结构钢。该钢冷塑性一般,退火、正火比调质时要稍好,具有较高的强度和较好的切削加工性,经适当的热处理以后可获得一定的韧性、塑性和耐磨性,材料来源方便。适合于氢焊和氩弧焊,不太适合于气焊。
4、焊前需预热,焊后应进行去应力退火。正火可改善硬度小于160HBS毛坯的切削性能。该钢经调质处理后,其综合力学性能要优化于其他中碳结构钢,但该钢淬透性较低,水中临界淬透直径为12~17mm,水淬时有开裂倾向。
一、机械性能:
σb\Mpa:≥600;σs\Mpa:≥355;δ5\%:≥16;ψ\%:≥40;硬度\HB:≤197
GB/T699-1999标准规定的45钢推荐热处理制度为850℃正火、840℃淬火、600℃回火,达到的性能为屈服强度≥355MPa
GB/T699-1999标准规定45钢抗拉强度为600MPa,屈服强度为355MPa,伸长率为16%,断面收缩率为40%调制处理硬度规格尺寸
二、45号钢和40Cr钢调质的热处理工艺:
调质是淬火加高温回火的双重热处理,其目的是使工件具有良好的综合机械性能。
调质钢有碳素调质钢和合金调质钢二大类,不管是碳钢还是合金钢,其含碳量控制比较严格。如果含碳量过高,调质后工件的强度虽高,但韧性不够,如含碳量过低,韧性提高而强度不足。为使调质件得到好的综合性能,一般含碳量控制在0.30~0.50%。
调质淬火时,要求工件整个截面淬透,使工件得到以细针状淬火马氏体为主的显微组织。通过高温回火,得到以均匀回火索氏体为主的显微组织。小型工厂不可能每炉搞金相分析,一般只作硬度测试,这就是说,淬火后的硬度必须达到该材料的淬火硬度,回火后硬度按图要求来检查。