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蛋白样品溶解液作用 | 蛋白样品溶解液作用原理

1. 蛋白样品溶解液作用原理

蛋白质溶解度 : 在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白质质量占试样中总蛋白质量的百分数。通常采用氮溶解指数(NSI)和蛋白质分散指数((PDI)来表示。 原理: 用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可溶性蛋白质,在催化剂作用下用浓硫酸将提取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。

加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用盐酸滴定测出试样中可溶性蛋白质含量;同时,测定原始试样中粗蛋白质含量,计算出试样的蛋白溶解度。

2. 蛋白样品溶解液作用原理是什么

① 红细胞的洗涤萊垍頭條

洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,采集的血样要及时采用低速短时间离心分离红细胞,然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入五倍体积的生理盐水,缓慢搅拌10min,低速短时间离心,如此重复洗涤三次,直至上清液中没有黄色,表明红细胞已洗涤干净。萊垍頭條

②血红蛋白的释放萊垍頭條

在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白。萊垍頭條

注:加入蒸馏水后红细胞液体积与原血液体积要相同。加入甲苯的目的是溶解细胞膜,有利于血红蛋白的释放和分离。條萊垍頭

2.粗分离頭條萊垍

①分离血红蛋白溶液萊垍頭條

将搅拌好的混合溶液离心后,试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的甲苯层,第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质的沉淀层,第3层是红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液,第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤,除去之溶性沉淀层,于分液漏斗中静置片刻后,分出下层的红色透明液体。頭條萊垍

②透析萊垍頭條

取1mL的血红蛋白溶液装入透析袋中,将透析袋放入盛有300mL的物质的量的浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液中,透析12h。透析可以去除样品中分子量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液。 垍頭條萊

3. 蛋白溶液的作用

不溶于水。

蛋白质是不溶于水的,但是蛋白质粉由于经过了处理是可以溶于水的,一般要用温水溶解才比较好,可以补充优质蛋白质,容易吸收。这就是水溶性蛋白质,其指的是可溶于水的蛋白质。一般蛋白类饲料原料中,水溶性蛋白含量:棉粕、菜粕2-6%,秘鲁鱼粉22%左右,巴拿马鱼粉和国产蒸汽鱼粉在16%左右。

而全鸡肉粉7%左右(可能是脂肪的原因所以有点偏低)(占样品的比例)。

4. 蛋白水解实验的原理是什么?

蛋白质的的水解产物是氨基酸。但彻底水解往往需要一个过程,也就是长链的蛋白质(比如说由1000个氨基酸水解而成)先要在蛋白酶的催化下水解成为较短链的多肽(比如说由10个氨基酸水解而成),最后再在肽酶的催化作用下彻底水解为氨基酸。

5. 水溶液提取蛋白质原理

题目中的重金属盐,应该是重金属盐溶液,如果是重金属盐固体,不会发生沉淀再溶解。

同意吗?如果同意,请往下看。否则回答作废。蛋白质水溶液中加入某种盐溶液,实际上改变了溶剂的性质,就是说溶剂已经不是水了,而是这种盐的溶液,而蛋白质在这种新的溶剂中的溶剂度要小于在水中的溶解度,如果溶液中的蛋白质的质量已经超出,溶液所能溶解的质量,那么就会有蛋白质析出。如果过量的加入这种盐溶液,相当于溶剂的质量增大,溶液成了蛋白质的不饱和溶液,沉淀的蛋白质就会重新溶解。这其中不存在蛋白质变性的问题。如果变性或者就不会溶解了。

6. 蛋白提取液提取蛋白的原理

白蛋白是在血清提取物,属于血制品。白蛋白是人体必须的重要的蛋白质,对于人体细胞的代谢,胶体渗透压起到非常重要的作用。正常情况下,人体的蛋白由肝脏合成。提取人血白蛋白,是在正常健康人群的血液提炼出来的为临床应用。健康的人体,通过摄入适当的含有蛋白比较高的食物,通过肝脏合成,足够人体的需求,不需要进行白蛋白的血制品的应用。

7. 蛋白质样品溶解液中各种试剂的作用

高中生物试验中试剂和药品的作用如下:

1、斐林试剂

作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。

还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。

2、班氏尿糖定性试剂

使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用。

3、双缩脲试剂

作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应。也可用于鉴定多肽。

4、苏丹Ⅲ

作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。

5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液

作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来。能杀死细胞固定。

6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)

作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察。

7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液

作用:观察成熟植物细胞质分离时用。经此处理细胞仍具活性。

8、质量浓度为0.1mg/ml的亚甲基蓝溶液

作用:(1)用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察;

(2)用于检测水中细菌情况,根据亚甲基蓝褪色情况,判断水质被细菌污染情况。

是活体染色剂。

9、丙酮

是有机溶剂,在叶绿体中色素提取时,用于溶解叶绿体中的色素。可用酒精替代,不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热

10、层析液

是一种脂溶性很强的有机溶剂,叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。

代用品:93号汽油、四氯化碳

11、SiO2、CaCO3

作用:加入少许SiO2是为了研磨得充分;加入少许CaCO3是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。

12、碘液

作用:用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物。

13、二苯胺

作用:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。

14、NaOH

作用:用于吸收CO2(验证光合作用需要CO2)或改变溶液的pH,

15、Ca(OH)2

作用:鉴定CO2(验证呼吸作用产生CO2)。

16、NaHCO3

作用:提供CO2等。

8. 蛋白质溶解的原理

  这是蛋白质变性的结果。  鸡蛋中含有大量的蛋白质,蛋白质受热、紫外线、X射线、强酸、强碱、重金属(如铅、铜、汞等)盐、一些有机物(甲醛、酒精、苯甲酸)等的作用会凝结,这种凝结是不可逆的,即凝结后不能在水中重新溶解,这种变化叫做变性.  蛋白质变性后,不仅丧失了原有的可溶性,同时也失去了生理活性.运用变性原理可以用于消毒,但也可能引起中毒.

9. 蛋白质样品液的制备

根据样品形式的差异进行选择。

如果是研究纯化的蛋白,可以用100℃,煮5min就行;

如果是研究细胞样品的膜蛋白,可以用膜蛋白抽提试剂盒先做目的蛋白的富集,而后同上处理

10. 蛋白样品溶解液作用原理图

去渍的原理

目前处理污渍可分:溶解作用、乳化作用、化学作用、分解作用等。

1、 溶解;溶解的概念;固体或气体物质与液体物质相混合,同时一分子状态均匀分散的一种过程 ,溶解过程比较复杂,有的物质在溶剂中可以以任何比例进行溶解,有的部分溶解,有的则根本不溶.化学组成类似的物质相互溶解容易,极性溶剂容易溶解极性质,非极性溶剂容易溶解非极性物质。

2、 溶剂:在化学组成上不发生任何变化、并能溶解其他物质【一般指固体】或者与固体发生化学反应并将固体溶解的液体。

3、 化学处理:利用某些化学品与污渍能够起化学反映的方法,将污渍从织物上去除。典型的化学反应:中和反映。常用的化学品;酸、碱以及金属盐类。

4、 分解:分解过程可使一些不溶于溶剂的污渍或附着在不允许使用溶剂和化学品的织物上的污渍变为可溶性污渍。分解除了可去除附着牢固的单宁渍和蛋白渍外,还可以去除那些附着再不能承受机械作用或热的织物上的蛋白污渍。常用的分解方法:主要是一些酶制剂,依靠各种酶将污渍分解成为可采用普通洗涤方法去除的物质。

5、 乳化:利用表面活性剂类洗涤剂或肥皂,通过湿润、渗透、分散、乳化等作用使污渍溶于水,加上机械力,产生大量泡沫,发挥乳化作用,污渍随之脱离织物,达到去污作用。

11. 蛋白样品溶解液作用原理是

蛋白提取试剂盒分离亚细胞器后,怎么验证蛋白纯度1.前处理把蛋白质从原来的组织或溶解状态释放出来,保持原来的天然状态,并不丢失生物活性。

常用的方法:匀浆器破碎、超生波破碎、纤维素酶处理以及溶菌酶等。超声波破碎法:当声波达到一定频率时,使液体产生空穴效应使细胞破碎的技术。超声波引起的快速振动使液体局部产生低气压,这个低气压使液体转化为气体,即形成很多小气泡。由于局部压力的转换,压力重新升高,气泡崩溃。崩溃的气泡产生一个振动波并传送到液体中,形成剪切力使细胞破碎。2.粗分级分离可用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大,3.细分级样品的进一步纯化。样品经粗分离以后,一般体积较小,杂蛋白大部分已被除去。进一步纯化,一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。必要时还可选择电泳、等电聚焦等作为最后的纯化步骤。结晶是最后的一步分离纯化的方法:1.分子大小;2.溶解度;3.电荷;4.吸附性质;5.对配体分子的生物亲和力等。(一)根据分子大小不同的纯化方法1.透析利用蛋白质分子不能通过半透膜,使蛋白质和其它小分子物质如无机盐、单糖等分开。2.密度梯度离心。蛋白质颗粒的沉降系数不仅决定于它的大小,而且也取决于它的密度。3.凝胶过滤利用蛋白质分子大小,因为凝胶过滤所用的介质是凝胶珠,其内部是多孔的网状结构。当不同的分子大小的蛋白质分子流过凝胶层析柱时,比凝胶珠孔径大的分子进入珠内的网状结构,而被排阻在凝胶珠之外随溶剂在凝胶珠之间的空隙向下移动并最先流出柱外,比网孔小的分子能不同程度底自由出入凝胶珠的内外,由于不同大小的分子所经路径不同而得到分离。大分子先被洗脱下来。小分子后被洗脱(二)利用溶解度差别的纯化方法1.等电点沉淀和PH的控制蛋白质处于等电点时,其净电荷为零,由于相邻蛋白质分子之间没有静电斥力而聚集沉淀。因此在其他条件相同时,它的溶解度达到最底点,利用等电点分离蛋白质是一种常用的方法。2.蛋白质的盐溶和盐析中性盐可以增加蛋白质的溶解度,这种现象称为盐溶。盐溶作用是由于蛋白质分子吸附某种盐类离子后,带电层使蛋白质分子彼此排斥,而蛋白质分子与水相互作用加强了,因而溶解度增加当溶液的离子强度增加到一定数值时,蛋白质的溶解度开始下降。当离子强度足够高时,很多蛋白质可以从水溶液中沉淀出来,这种现象称为盐析。盐析作用的主要原因是大量中性盐的加入使水的活性降低,原来溶液的大部分甚至全部的自由基水转变成盐离子的水化水