基因检测方法 | 基因检测方法学有哪几种 | 小蚂蚁百科|知识百科大全

1. 基因检测方法学有哪几种

1、直接测定：按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对。

2、mRNA测定：根据目的基因组得出其转录的mRNA组成，利用探针检测。

3、蛋白测定：可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白，也可采用免疫化学法导入蛋白抗体检测蛋白。

对目的基因进行鉴定和检测的多种方法：

基因鉴定技术是一项生物学检测技术，人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA，每个人的DNA都不完全相同，人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多，因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异，由此可以识别不同的人。

所谓“DNA指纹”，就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质，因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。

基因鉴定的原理其实是DNA分子杂交，这种分子杂交是在缓冲液中进行的，由于DNA分子杂交时，两个分子相遇的机会不是很大，所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测的DNA分子。

而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手段，所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的，而是先进行PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。

2. 检测基因型的常用方法

A重组DNA技术的基本定义

　　重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。因此，供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。

　　B 基因工程的基本定义

　　基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。

　　基因工程是利用重组技术，在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对各种生物的核酸（基因）进行改造和重新组合，然后导入微生物或真核细胞内进行无性繁殖，使重组基因在细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新的生物类型。

　　从实质上讲，基因工程的定义强调了外源DNA分子的新组合被引入到一种新的寄主生物中进行繁殖。这种DNA分子的新组合是按工程学的方法进行设计和操作的，这就赋予基因工程跨越天然物种屏障的能力，克服了固有的生物种间限制，扩大和带来了定向创造生物的可能性，这是基因工程的最大特点。

　　基因工程包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构成新的重组的DNA，然后送到受体生物中去表达，从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。

　　基因工程要素：包括外源DNA，载体分子，工具酶和受体细胞等。

　　一个完整的、用于生产目的的基因工程技术程序包括的基本内容有：（1）外源目标基因的分离、克隆以及目标基因的结构与功能研究。这一部分的工作是整个基因工程的基础，因此又称为基因工程的上游部分；（2）适合转移、表达载体的构建或目标基因的表达调控结构重组；（3）外源基因的导入；（4）外源基因在宿主基因组上的整合、表达及检测与转基因生物的筛选；（5）外源基因表达产物的生理功能的核实；（6）转基因新品系的选育和建立，以及转基因新品系的效益分析；（7）生态与进化安全保障机制的建立；（8）消费安全评价

3. 基因检测的检测方法

基因检测材料就是提供体细胞，上皮细胞，生殖细胞，血红细胞等都可以。

基因检测是通过血液、其他体液、或细胞对DNA进行检测的技术。检测的时候，先把受检者的基因从血液或其他细胞中提取出来关注。然后用可以识别可能存在突变的基因的引物和PCR技术将这部分基因复制很多倍，用有特殊标记物的突变基因探针方法、酶切方法、基因序列检测方法等判断这部分基因是否存在突变或存在敏感基因型。我们通常的医疗检测手段是针对疾病的具体症状或已有病变进行检测。基因检测是每个人都该拥有的生命说明书。通过个人遗传性基因检测，可破译生命密码。

4. 基因检测方法有哪些

目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。

以上步骤完成后，在全部的受体细胞中，真正能够摄入重组D NA分子的受体细胞是很少的。因此，必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检测。检测的方法有很多种，例如，大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。重组DNA分子进入受体细胞后，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。

5. 基因检测是怎样检测法

基因检查方法是通过测序的办法进行，可以通过一代测序方法RT-PCR或者Sanger。

近年来出现二代测序方法，二代测序方法和一代测序方法明显的不同在于一代是针对个别已知的基因进行检查，效率低。二代检测则是通过高通量，即基因捕获的办法进行检查，既可以对已知的基因进行检查，也可以对未知的基因检查，进而了解更多与疾病诊断、预后和治疗相关的基因改变。

如果从基因检查的取材，即检查材料方面分，可以分为组织学检查和液体活检。液体活检就是对血液、体腔积液，包括胸腔积液或者腹腔积液进行相关的基因检查。

6. 基因检测的种类和方法

检测目的基因是否转录通常采用分子杂交的方法。

基因表达分为转录及翻译两阶段，转录是以DNA（基因）为模板生成mRNA的过程，翻译是以mRNA为模板生成蛋白质的过程，检测外源基因的表达就是检测特异mRNA及特异蛋白质的生成。所以基因表达检测分为两个水平：即转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测。

转录水平上的检测主要方法是Northern杂交，它是以DNA或RNA为探针，检测RNA链。和Southern杂交相同，Northern杂交包括斑点杂交和印迹杂交。　　

也可用RT-PCR（reverse transcribed PCR）方法检测外源DNA在植物体内的转录表达。其原理是以植物总RNA或mRNA为模板进行反转录，然后再经PCR扩增。如果从细胞总RNA提取物中得到特异的cDNA扩增条带，则表明外源基因实现了转录。此法简单、快速，但对外源基因转录的最后决定，还需与Northern杂交的实验结果结合

7. 基因检测的方法有哪几种

在回答这个问题时我们先来了解下什么叫驱动基因。

驱动基因是指癌症发生发展时的相关存在的重要基因，又称驱动基因。

驱动基因特性及应用：每种驱动基因致病作用是不同的。不同的癌症病人有不一样的驱动基因，当它发生驱动基因突变时，就能把癌细胞“驱动”起来引发所攻击部位器官发生癌变。如80%的不吸烟腺癌的驱动基因为表皮生长因子受体(EGFR)都是受它驱动的。因此找到驱动基因对于开展针对性的治疗有着十分重要的意义。临床上常用靶向药物进行“量体载衣”式的个性化治疗癌症病人。

临床常用的驱动基因检测技术有数十种，这里以三甲医院实验室常用的方法例举介绍如下：

1：免疫组织化学法

2：荧光原位杂交法

3：FISH检测法

4：基因测序法

5：高通量测序法

6：等位基因特异性检测法

7：液体活检检测法

总之上述的这些方法技术原理：都是通过筛查驱动基因突变和癌细胞中能编码关键蛋白的基因演变对细胞生长影响的驱动突变信号。癌基因依赖倾向使驱动基因突变成为很好的生物标志物。如肺癌患者血液中常存在无细胞ctDNA和循环肿瘤细胞。临床中常见的突变驱动基因有：表皮生长因子受体基因，突变或间变性淋巴瘤激酶以及ROSl基因重排等驱动基因。