如何检查无菌室或接种箱灭菌效果？

接种室（箱）在每次接种前均要采用化学方法进行消毒灭菌，灭菌效果受药剂有效期及操作等因素影响，很不稳定，因此应定期对消毒灭菌效果和空气污染程度进行检验，以便更换失效药剂，改进消毒措施和操作方法。常用检验方法有平板法和斜面法两种： 　　（1）平板法：一般是采用培养微生物主要类群的常规法，配制肉汤琼脂培养基和马铃薯葡萄糖培养基，按无菌操作规程分别将培养基倒入培养皿中制成平板，每种培养基各取6个，同时放入接种室（箱）内。检验时，按无菌操作法各打开3个皿盖，暴露一定时间后再重新盖上；另3个不打开皿盖作对照。然后将两组一起置于30℃温度条件下进行培养，48小时后取出观察。根据有无菌落、菌落个数和形态，来判断接种室（箱）被污染程度和杂菌种类。 　　（2）斜面法：取常规制作的肉汤琼脂培养基和马铃薯葡萄糖培养基斜面试管各6支，放入接种室（箱）内，按无菌操作法各打开其中3管试管棉塞（拔下的棉塞置于无菌培养皿中），暴露一定时间后，再重新塞上棉塞，另3管不打开棉塞作对照，然后将两组一起置于30℃温度条件下培养，48小时后取出观察。根据有无菌落、菌落个数和形态，来判断接种室（箱）被污染程度和杂菌种类。 　　合格标准：平皿打开盖5分钟不超过3个菌落；斜面打开棉塞30分钟不长菌落。若生长菌落超过此数字，则要采取措施提高灭菌效果。如果是用紫外线灯照射达不到灭菌要求，则可调整紫外线灯照射时间或悬挂高度，或更换新灯管。从菌落形态看，如果是霉菌占多数，先用5％石炭酸对接种室（箱）进行全面喷雾，再用福尔马林熏蒸；如果是细菌占多数，采用乳酸和福尔马林交替熏蒸法效果好。