菌落PCR的具体操作方法
1.取15-20ul
tris-hcl
放到编好号的0.5ml
的ep管中
2.用灭菌牙签,或枪头,沾取少量菌体(多了效果不好)
3.并将枪头或牙签在刚取出来的tris-hcl中涮一下,可以看到溶液略微变浑浊
4.盖上管盖,100c煮沸5-10min
5.离心,取1-2ul上清配制pcr反应体系。如果菌体较多,则取0.5ul就够了
6.设置pcr仪程序,进行反应
7.结果电泳检测即可
真菌能做菌落pcr吗
真菌能做菌落pcr
这个是因为大肠杆菌是杆菌属于原核生物(细胞壁是由肽聚糖组成的细胞壁,且没有细胞核),很容易破裂而且在做PCR的时加的缓冲液下破裂后遗传物质就出来了就可以做模板了(但是浓度不高所以在做菌落PCR时加的模板就比较多),而酵母菌是真核生物(有含甲壳素为主要成分的细胞壁,且有细胞核),酵母比较难破,就算破了遗传物质还在细胞核中,,所以真菌是不可以菌落PCR的。。纯手打!
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