1. depc水使用方法
是DEPC处理过的水,DEPC是diethypyrocarbonate,中文名为焦碳酸二乙酯。它是一种RNA酶抑制剂,具有挥发性(很香的气味),有潜在致癌性。DEPC-H2O用于各种需要保证无RNA酶污染的实验中,通常DEPC-H2O是经过灭菌的,而DEPC在高温灭菌后分解为二氧化碳和水,没有毒性。
2. DEPC水作用
高压灭菌一般需要40分钟
3. depc水是什么水
两种都可以,看具体实验而定。
一般而言常规pcr引物分两个浓度,一个是高浓度储存液,它是使用浓度的10x,高浓度储备引物用TE溶解;使用浓度的引物用灭菌的ddH2O稀释或溶解。
如果只是纯粹的DNA pcr,则使用常规超纯水及其配制的TE缓冲液溶解引物即可。如果要做RNA基础的PCR,如反转录pcr,qRT—PCR,则需要使用depc处理的纯水及其TE溶解引物,因为rns酶不易失活,必须depc处理。
4. depc水怎么用
DEPC水是用DEPC(diethyl pyrocarbonate,焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压灭菌的MiliQ纯水,无色液体。经检测不含杂质RNA、DNA和蛋白质。 DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解,含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等,以及其它各种要求无RNase、DNAase和proteinase的反应体系。
5. DEPC水怎么配置
主要原因就是为了DEPC能被分解,而不至于残留到耗材上对下游实验有影响,或是对人身健康有危害,因此才会过夜处理的。DEPC(处理)水是指用DEPC处理过并经高温高压消毒的MiliQ纯水。MiliQ纯水加0.1% DEPC,混匀过夜,121℃,20min。而后DEPC即降解成二氧化碳和酒精,失去毒性。DEPC是一种有效的核酸酶抑制剂,它能够与很多酶的-NH,-SH或-OH等基团发生反应,从而破坏酶的活性中心。
DEPC溶液浓度约为0.1% (v/v)时可使RNase失活,从而防止RNA被降解。
在进行RNA实验时,常用DEPC处理实验所用的各种试剂。
DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解,含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等,以及其它各种要求无RNase、DNAase和proteinase的反应体系。
但是DEPC有刺激性,对眼睛和气道粘膜有强刺激,在操作中应尽量在通风的条件下进行,DEPC毒性并不是很强,但吸入的毒性最强。
且通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性,常用于生物实验中RNA的提取等。
6. depc水和depc处理水
因为depc是有毒的。必须通过高温使其失活,才能够正常使用。
7. depc水的配制
DEPC水是用DEPC(diethylpyrocarbonate,焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压灭菌的MiliQ纯水。经检测不含 RNase、DNase和proteinase DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解,含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等,以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系 DEPC水是生物技术分子细胞实验中经常用到的试剂,它可以在RNAase free的要求下完成实验,避免RNAase的污染。。希望对你有用。