生产液体菌种应该注意培养条件和菌种检测2个方面: (1)培养条件:斜面培养是将新接斜面菌种于24℃~25℃下培养,5~6天菌丝长满斜面,如不马上使用可保存4℃冰箱中备用;②种子培养:一级种子培养(摇瓶)是将新鲜斜面母种接种于500毫升三角瓶盛100毫升的种子培养基,放置在180转/分钟的旋转摇床上,24℃~25℃下培养2~3天,菌液变稠取下,经检查未污染杂菌可供使用;二级种子培养(摇瓶)是用5000毫升大三角瓶,盛1000毫升种子培养基,接1瓶一级种,置90转/分钟旋转摇床培养2天即可;种子罐种子扩大培养接种量5%~10%,温度24℃~26℃,搅拌速度150~180转/分钟,通气量每分钟为1:0.5(V/V),罐压0.3千克,培养2~3天,待无菌检查未污染杂菌接入二级种子罐或发酵罐;③发酵培养:接种量5%~10%,温度24℃~26℃,搅拌速度为150~180转/分钟,通气量每分钟为1:0.5(V/V),培养5~6天。 (2)菌种检测,包括纯度检查、活力检查和酸度检测:①纯度检查:无菌实验检查阴性,可采用显微镜观察和霉菌、细菌常规培养试验方法;②活力检查:外观菌丝浓稠并有香味,以菌丝体发酵液能够静止5秒钟而无菌丝下降现象为活力强的判断。同时通过显微镜观察菌丝粗细、分枝等情况;③酸度检测:用酸度计测定pH值4~5。