1. 浓缩胶浓缩原理
这个得看实验中TEMED和AP的量,质量如何,另外实验室温度也会有影响。 如果一切正常,也是室温的话,或温度稍高,有个20-30min是可以用了。 但是如果AP失效,TEMED不太好,或者实验室温度较低的话,这个时间就得延长。具体延长多少,需要根据分离胶凝固的时间作为参考进行判断。
有的时候为了保险起见,有人会让胶聚合1个小时以后再使用。不过也需要担心过长时间放置可能会导致胶的水分蒸发,出现皱缩。
2. 浓缩胶浓缩原理图解
浓缩胶里完成完全SDS化、以及把一些大的离谱的东西去掉分离胶就分离。。。
3. 浓缩胶作用原理
凝胶下层是分离胶。
分离胶指不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分,其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩胶均不 同,具有分子筛效应的小孔径凝胶。蛋白质或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶, 由于分子筛作用,小分子的物质容易通过, 阻力小,迁移速度快;大分子的则受到较大 的阻力而被滞后。因此即使净电荷相似、泳 动率相等的物质分子也会由于分子筛效应,根据其各自分子量的大小而在分离胶中被分开。常用于检测蛋白质纯度、测定蛋白质分 子量以及DNA序列分析过程中DNA片段 的分离、鉴定。
4. 浓缩胶浓缩原理是什么
浓缩胶的目的使得loading的样品能够在同一条水平线上进入分离胶,如果电压太大前端的蛋白容易在后面的蛋白赶上来前进入分离胶。
而在分离是理论上小电压长时间分离的效果会更好,但是在操作过程中没有必要等那么长的时间,所以就用大电压快点跑。
5. 浓缩胶的浓缩原理
配胶时,建议浓缩胶室温凝固20-30分钟后,再加分离胶,室温凝固2-3小时后再用效果佳,如果当天配完不用,需塑料薄膜手套之类的将其包好,放置 4°冰箱过夜,第二天即用,不建议时间过长使用
半小时到40分钟左右
半小时到40分钟左右,天凉时间会长一些,也取决于TEMED等,提前配好胶到时再用也是可以的。
6. 浓缩胶的作用机理
大概几分钟吧,只要干了就会凝固了。
7. 浓缩胶浓缩蛋白质的原理
1、性质不同
浓缩胶:在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中,同一介质的凝胶浓度分为 两种,负极的加样侧一般浓度为2%〜5%。
分离胶:不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分,其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩凝胶不同。它具有分子筛效应的小孔径凝胶。
2、过程不同
浓缩胶过程:由于浓缩胶浓度低、孔径大,分离胶浓度高,孔径小。带电蛋白质或核酸离子在大孔径凝胶中运动时,阻力小,运动速度快。当接近小孔径凝胶时,阻力较大,移动速度减慢,使样品浓缩,形成窄带,减少电泳过程中的带扩散。
分离胶过程:蛋白质或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶,由于分子筛的作用,小分子物质容易通过,阻力小,迁移速度快。大分子由于较大的电阻而滞后,因此,即使具有类似净电荷和相等的游泳率的物质,也会根据分子量的不同而通过分子筛效应从凝胶中分离出来。
8. 浓缩胶和分离胶的原理
加一层水称为水封。目的是隔绝空气使催化反应快速进行,进而形成凝胶,还可使分离胶上沿平直。并且加水后,保持分离胶表面的平整性,使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上。
9. 浓缩胶浓缩原理图
通过较高的ph值使蛋白质在胶中的移动速度缓慢,导致蛋白质不能够分离。使所有蛋白质都在浓缩在一起。
10. 浓缩胶浓缩样品的原理
一般一小时之内就可以用。
wb配胶,一般是先配分离胶,再配浓缩胶。分离胶里含的促凝剂含量较小,灌胶体积也较大,所以一般灌好胶要半小时左右才能凝固,浓缩胶里含的促凝剂含量较大,灌胶体积也较小,所以一般灌好胶十分钟左右就能凝固。总体加起来一个小时内就可以使用。