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细胞提取液的作用 | 细胞提取物是什么

1. 细胞提取物是什么

蚕丝是成蚕结茧时所分泌丝液凝固而成的连续长纤维,也叫天然丝,是天然纤维的一种,也是人类最早运用的动物纤维之一。

工业领域

将蚕丝加工成微粒的丝粉,除用于化妆品或保健食品的添加剂外,还可将其制成含丝粉的绢纸或食品保鲜用的包装材料和具有抗菌性的丝质材料。丝素膜除了用于加工隐形眼镜片外,还可将其细至0.3微米的丝粉与树脂混合,开发出被称为“丝皮革”的新产品。

医疗行业

蚕丝作为构成绢丝成分的丝素和丝胶,通过浓硫酸处理,能获得与肝磷脂相同的物质,具有抗凝血活性、延缓血液凝固时间的作用,可开发血液检查用器材或抗血栓性材料。

美容行业

天然蚕丝的结构与人体肌肤极类似,故又有人体"第二皮肤"的美称。现代医学实验进一步证明,蚕丝的蛋白质含量大大高于珍珠,其中含氮量比珍珠高37倍,主要氨基酸含量高达10倍以上。这些氨基酸能直接为人体毛发,皮肤吸收与吸附。即在人体表皮的外层更容易渗透,加速皮肤的新陈代谢。丝缩氨基酸还能有效地抑制皮肤中黑色素的生成。

2. 细胞的提取

提取口腔粘膜DNA方法

1. 用清水漱口,使口腔清洁。

2. 盒内有两管和取样小棍, 1号平底及2号尖底. 取出1号管,立于桌上, 等盖上溶液集中到管底。小心地把盖打开。

3. 取出带齿的DNA收集小棍,

伸入口腔内侧的颊部(位于上下牙齿之间的部位),由后向前不同部位刮六次,再刮另一侧的粘膜取DNA样品。

4. 将有DNA样品的小棍浸入1号管的溶液中,转动数次,将DNA细胞洗到溶液中。 上下转动可使上端残留也收集到管中。

5.

为保证提取足量的DNA样品,建议用清水洗涤小棍后再用以上方法再刮一次收集到1号管中。此时,溶液应呈混浊。把取样小棍弃掉。

6.

取出2号管,小心等盖上、瓶比壁溶液都收集到管中(可轻轻甩动)。将1号管中的溶液全部倒入2号管中,盖上2号管的螺旋盖并拧紧,上下用力摇10次。

7. 将2号管置入样品袋中寄回本公司指定的收集站。

注意:勿将DNA收集小棍浸到2号管中。 如发生此类事件,请用清水反复洗涤口收集小棍后方可再用。

3. 细胞提取液是什么物质

western blotting的Lysis buffer,是裂解细胞提取蛋白用的裂解液.SDS是十二烷基硫酸钠,RIPA裂解液组成: 50 mM Tris-HCl (pH 7.4,三羟甲基氨基甲烷-盐酸), 150 mM NaCl, 1% NP-40,0.1% SDS(不同公司的配比不同,有用Tris-hcl PH=8.0的,加0.5%的去氧胆酸钠)NP-40(Tergitol-type )是很温和的去垢剂,主要用于全细胞蛋白的提取,全称乙基苯基聚乙二醇-40.tris-triton组成:10 mM Tris,100 mM NaCl,1 mM EDTA,1 mM EGTA,1% Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚),10%的甘油,0.1% SDS,0.5% deoxycholate(脱氧胆酸盐).

4. 细胞提取物是什么成分

肽从蛋白质中提取的,蛋白质是用多种肽链组成的,肽是蛋白质的组成单位。

肽是由由氨基酸脱水而成,含有羧基和氨基,是一种两性化合物。亦称“胜”。它是由两个或多个氨基酸通过一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基结合而成。一个氨基酸不能称为肽,也不能合成肽,必须是两个或两个以上氨基酸以肽键相连的化合物。

肽可由膳食蛋白质(Dietary protein)通过化学方法水解出来,也可以人工方法取得.系由两个或以上的氨基酸(Amino acids)聚合所构成,在细胞生理及代谢功能的调节上甚为重要。肽大多性质不稳定,长期贮存宜防潮,放在4℃以下的地方。

5. 细胞提取物是什么意思

卷柏提取物(复活草)精萃带来的强大修复能力,具备强效补水保湿能力,使肌肤深层补水,有效锁水,长效保湿。

本身气味清香,无油腻感,精华液很好吸收,改善冬天皮肤易脱皮的情况。

另外卷柏提取物低浓度时对黑色素细胞活性有强力的抑制,可以用于去除色斑的化妆品;

6. 细胞提取液成分

提取新鲜心肌组织细胞内线粒体的方案:心肌组织切碎后在4 ℃介质(0.25 mol/L蔗糖、10 mmol/L Tris-HCl pH7.4,0-4℃)中制备心肌组织匀浆。匀浆经750g、离心10 min后留上清,以9000 g离心20 min 后留沉淀,重新悬浮后以9000 g再离心20 min,弃上清得线粒体.全部操作于4 ℃进行。

培养细胞提取线粒体.细胞弃去培养液后,用细胞收集液作用2到3 min,用scraper,将细胞收集起来,6000 g离心15 min。

弃上清,之后加细胞匀浆液,用匀浆器或手动匀浆管匀浆,将装有匀浆液的离心管配平后放入普通离心机,以2500 rpm,离心15 min,缓缓取上清液,移入高速离心管中,保存于有冰块的烧杯中.以17000 rpm离心20 min,弃上清,留取沉淀物。

加入0.25mol/L蔗糖与0.003 mol/L氯化钙液l ml,用吸管吹打成悬液,以17000 rpm离心20 min,将上清吸入另一试管中,留取沉淀物,加入0.1ml 0.25mol/L蔗糖与0.003mol/L氯化钙溶液混匀成悬液.即得线粒体。

7. 组织细胞提取

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:

Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。

Trizol作用原理:

在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。

水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。

8. 细胞液提取

一、DNA提取(粗提取)

1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb

2、甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。

3、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。

4、异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)

5、表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。

6、加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。

7、碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。

二、DNA的浓缩(精提取)

1、固体聚乙二醇(PEG)浓缩:用透析袋外敷PEG至合适量。

2、丁醇抽提浓缩:DNA溶液中水可分配到正丁醇或仲丁醇,但DNA不会。因此重复几次可显著减少DNA体积。

3、乙醇或异丙醇沉淀:(1)需要阳离子盐的存在,NaAc最常用,NaCl对含SDS样品好,NH4Ac去除dNTP好。PiCl沉淀RNA好,但不能用于反转录前。(2)沉淀温度与时间;0℃一4℃,12000g,10分钟,小于100bp DNA需超速离心。

4、精胺沉淀法:与DNA结合后使DNA结构凝缩沉淀,需在无盐或低盐溶液。