1. 硫酸镁在培养基中的作用
r2a培养基原理如下:
1、r2a培养基可以修复被氯气损伤的细菌,支持耐受氯气的微生物的生长。
2、r2a培养基中的酵母浸出粉、蛋白胨、酸蛋白水解物提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖、为可发酵糖类;可溶性淀粉可以吸收菌在复苏过程产生的有害物质;
3、r2a培养基中的丙酮酸钠可增强细菌的复苏。
4、r2a培养基中的磷酸二氢钾为酸碱缓冲剂,无水硫酸镁提供二价阳离子,琼脂为凝固剂。
2. 硫酸镁在培养基中的作用是什么
培养基配方(成分g/L):
蛋白胨 10.0;牛肉提取物 10.0;酵母提取物 5.0;葡萄糖 20.0
柠檬酸三铵 2.0;乙酸钠 5.0;MgSO4 0.1;MnSO4 0.05;K2HPO4 2.0
吐温80 1.0
配制方法:
1.称取55g本产品,加入1000ml纯水重悬。
2.调节pH。
3.121°C灭菌15min。
MRS培养基结果与分析
乳杆菌的生长表现为培养基变浑浊。由于营养要求的不同,某些乳杆菌在该培养基上生长较差或不能生长。
应用:
MRS肉汤培养基用于降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解机理研究。
用途:
MRS肉汤培养基根据DeMan、Rogosa和Sharpe法用于各种材料中乳酸菌菌种的增菌、培养和分离。 乳酸菌MRS肉汤和MRS琼脂培养基(MRS固体培养基)也能用于乳杆菌鉴定中的检测实验。
工作原理:
蛋白胨提供氮源。牛肉浸粉和酵母提取物作为维生素来源。葡萄糖是可发酵的碳水化合物。培养基的微酸性环境,有利于乳酸杆菌的生长。乙酸钠和柠檬酸铵是选择剂,同时也是能量物质。乙酸钠对革兰氏阴性细菌和霉菌有抑制作用,但对乳酸杆菌无影响。硫酸镁和硫酸锰提供代谢必需的离子。司班80或吐温80是非离子型表面活性剂,辅助乳杆菌对营养物质的利用。
3. 硫酸镁在培养基中的作用有哪些
罗氏培养基是分离培养结核分枝杆菌的常用培养基。
主要成分包括新鲜鸡蛋液、谷氨酸钠、甘油、孔雀绿、磷酸二氢钾、硫酸镁、柠檬酸镁、马铃薯淀粉。培养基的氮源为天冬酰胺,赋形剂为鸡蛋白。
用 途:痰液细菌培养。用于培养结核分支杆菌的,一般为斜面,含有卵黄、马铃薯粉等营养成分,以及抑菌剂孔雀绿,所以培养基呈绿色。
4. 培养基中氯化镁的作用
DF12培养基是指DMEM/F12培养基,它的成分众多,是一种光普培养基,可根据接种的菌群特性酌情减少相应的配比。最完整的配比如下(含量为mg/l):
无水氯化钙 116.6萊垍頭條
L-亮氨酸 59.05 萊垍頭條
亚油酸 0.042 萊垍頭條
五水硫酸铜 0.0013 萊垍頭條
L-赖氨酸盐酸盐 91.25 萊垍頭條
硫辛酸 0.105 頭條萊垍
九水硝酸铁 0.05 條萊垍頭
L-蛋氨酸 17.24 條萊垍頭
酚红 8.1 垍頭條萊
七水硫酸亚铁 0.417 條萊垍頭
L-苯丙氨酸 35.48 頭條萊垍
1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081 萊垍頭條
氯化钾 311.8 萊垍頭條
L-丝氨酸 26.25 條萊垍頭
丙酮酸钠 55 萊垍頭條
氯化镁 28.64 萊垍頭條
L-苏氨酸 53.45 萊垍頭條
维生素H 0.0035 頭條萊垍
无水硫酸镁 48.84 萊垍頭條
L-丙氨酸 4.45 萊垍頭條
D-泛酸钙 2.24 萊垍頭條
氯化钠 6999.5 萊垍頭條
L-天门冬酰胺 7.5 萊垍頭條
氯化胆碱 8.98 萊垍頭條
无水磷酸二氢钠 54.35 條萊垍頭
L-天门冬氨酸 6.65 頭條萊垍
叶酸 2.65 條萊垍頭
磷酸氢二钠 71.02 頭條萊垍
L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 萊垍頭條
i-肌醇 12.6 萊垍頭條
七水硫酸锌 0.432 萊垍頭條
L-谷氨酸 7.35 垍頭條萊
烟酰胺 2.02 條萊垍頭
L-精氨酸盐酸盐 147.5 萊垍頭條
L-脯氨酸 17.25 萊垍頭條
盐酸吡哆醛 2 萊垍頭條
L-胱氨酸盐酸盐 31.29 條萊垍頭
L-色氨酸 9.02 頭條萊垍
盐酸吡哆醇 0.031 條萊垍頭
L-谷氨酰胺 365 萊垍頭條
L-酪氨酸 38.4 萊垍頭條
核黄素 0.219 萊垍頭條
甘氨酸 18.75 垍頭條萊
L-缬氨酸 52.85 萊垍頭條
盐酸硫胺 2.17 條萊垍頭
L-组氨酸盐酸盐 31.48 條萊垍頭
D-葡萄糖 3151 萊垍頭條
胸苷 0.365 條萊垍頭
L-异亮氨酸 54.47 萊垍頭條
次黄嘌呤 2 萊垍頭條
维生素B12 0.68 萊垍頭條
将原材料完全溶解。根据需要可加入碳酸氢钠调整PH为6.60-7.20,若不加碳酸氢钠则溶液PH为5.50-6.10 。萊垍頭條
5. 培养基中加硫酸镁的作用
材料:
马铃薯20g、蔗糖 2g、自来水 100mL、琼脂 2g、pH 自然(约6.0)
灭菌:1.05kg/cm2,20min
马铃薯处理方法:
马铃薯去皮,切成块加水,煮沸30min(注意火力的控制,可适当补水) ,用纱布过滤,滤液加糖,补足水至100ml,装入三角瓶。
综合马铃薯培养基 20%马铃薯煮汁 1000 毫升 磷酸二氢钾 3克 硫酸镁 1.5克 葡萄糖 20克 维生素 10毫克 琼脂 18克 先配制20%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6。分装,灭菌,备用。 该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。马铃薯糖琼脂培养基 把马铃薯洗净去皮,取200克切成小块,加水1000毫升,煮沸半小时后,补足水分。在滤液中加入10克琼脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。 把这培养基的pH值调到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。 按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的,称为合成培养基或综合培养基。马铃薯培养基就是天然培养基,综合马铃薯培养基就是人工合成的。
不同的生物需要不同培养基,注意配方的选取,称取要准确,误差不能太大对于特殊物品,不能灭菌的要用过滤方法除菌。配好后高温高压灭菌,可以在室温下放置很久,如果打开使用过一次,请放置冰箱。如果长时间不用,一定要重新配置,不能拿以前的用来培养,避免污染。
培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为:配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。
(一)配料
按培养基处方准确称取各种成分,先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水,再加入各种成分,以防蛋白胨等粘附于瓶底,然后再以剩余的水冲洗瓶壁。
(二)溶化
将各种成分混匀于水中,最好以流通蒸气溶化半小时,如在电炉上溶化应随时搅拌,如有琼脂成分时更应注意防止外溢。溶化完毕,补足失去的水分。
(三)矫正pH
1.pH
测定取与标准管同口径的试管(通常用华氏试管)3支,于第1、3管各加入欲测定pH的的培养基5ml,并于第一管中加入0.2g/L的酚红0.25ml作为测定管,混匀;于第2管加入蒸馏水5ml,第4管为pH标准比色管。
2.pH
的校正若测定管过酸或过碱可用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸溶液矫正,直至颜色与标准管相同为止,加碱或加酸时要精确缓慢,每加1滴后要充分混匀,比色后再加第2滴(有时仅加半滴)准确记录加入的量。
3.计算
设5ml培养基矫正pH至7.4时需0.1mol/L氢氧化钠0.15ml,现有培养基4990ml,需加氢氧化钠的量可按下列方法计算:5∶4990=0.15∶X
X=0.15×4990/5=149.7(ml)
如将此0.1mol/L的氢氧化钠改用1mol/L的氢氧化钠时,则需14.9ml即可。
(四)过滤澄清
培养基配制后一般都有沉渣或混浊出现,需过滤成清晰透明后方可使用,常用的过滤方法如下:
1.
必须清晰,以便观察细菌的生长情况,常用滤纸过滤,亦可在加热前加入用水稀释的鸡蛋白(1000ml培养基用1个鸡蛋白)在100℃加热后保持60~70℃40~,使其不溶性物质附于凝固的蛋白上而沉淀,然后再用虹吸法吸出上清液或以滤纸过滤。
2.固体培养基
如系琼脂培养基,于加热融化后需趁热以绒布或两层纱布中夹脱脂棉过滤;亦可用
自然沉淀法,即将琼脂培养基盛人铝锅或广口搪瓷容器内,以高压(103.43kPa)蒸汽融化15分钟后,静置高压锅内过夜,次日将琼脂倾出,用刀将底部沉渣切去,再融化即可收清晰的琼脂培养基。
(五)分装
1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。
2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5,灭菌后须趁热放置成斜面,斜面长约为试管长的2/3.
3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3,灭菌后直立凝固待用。
4.高层琼脂分装量约为试管的1/3,灭菌后趁热直立,待冷后凝固待用。
5.液体培养基分装于试管中,约是试管长度的1/3.
6.琼脂平板:将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右,以无菌手续倾人灭菌平皿内,内径225px的平皿倾注培养基约13~15ml,轻摇平皿底,使培养基平铺于平皿底部,待凝固后即成,倾注培养基时,切勿将皿盖全部启开,以免空气中尘埃及细菌落入。
新制成的平板培养基(简称平板),表面水分较多,不利于细菌的分离,通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。
6. 七水硫酸镁在培养基中的作用
罗氏培养基全称罗-琴(L-J)培养基(Lowenstein-Jenden medium)。【主要组成成分】新鲜鸡蛋液、谷氨酸钠、甘油、孔雀石绿、磷酸二氢钾、硫酸镁、柠檬酸镁、马铃薯淀粉。【和其他的培养基的区别】
1、用 途:痰液细菌培养。用于培养结核分支杆菌的,一般为斜面,含有卵黄、马铃薯粉等营养成分,以及抑菌剂孔雀绿,所以培养基呈绿色。
2、检验原理:分枝杆菌等痰液细菌在人工培养时,必须有足够的营养成分。
谷氨酸钠为细菌生长提供氮源;鸡卵液与马铃薯淀粉不仅是良好的营养物质,而且还能降低脂肪酸的毒性;甘油和枸橼酸盐可补充碳源;钾、镁、磷、硫等无机盐也是细菌生长不可缺乏的生长元素;磷酸盐有缓冲作用;因此,培养基能提供大多数分枝杆菌良好的生长环境。
3、样本要求:采用“碱处理-中和离心沉淀法”或“NaCL-NaOH法”处理临床样本。4、使用方法:
1) 将培养基复温至常温25℃ 2) 取经消化处理和离心沉淀的浓缩液0.1ml(约二滴)滴种于培养基的斜面上,尽量摇晃;
3) 置 35℃5%~10%CO2温箱内培养1~4 周,观察结果。
7. 培养基中硫酸镁加多了怎么办
传统菌种生产工艺,一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种,生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点,接种到培养料内有流动性好、萌发点多,发菌迅速等特种点。培养液是菌丝生长发育的营养源,要求营养全面均衡。不同的菌种对营养要求偏重不同。配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培养液时,先将土豆片、麸皮一起煮熟,将汁液滤出,后加入其它辅料混匀即可。
8. 培养基中镁离子作用
镁是植物进行光合作用的必需元素,实验思路是,配置完全培养液和只缺镁培养液,把长势相同的植物放到培养液中,培养一段时间检测植物光合作用的速率,然后再限制缺镁的培养液中加入镁离子植物的光合作用,树立上升
9. 培养基中硫酸钙的作用
建筑用石膏可以用于平菇种植,无论生熟石膏都可以使用。
栽培平菇使用的石膏是硫酸钙,栽培料中一般使用量在2%左右,起到调节ph的作用,稳定培养基的ph,改善基质的理化性能。
在食品工业中,它的正式名称被称为“食品添加剂硫酸钙”,俗称“食用石膏”,它只能使用天然石膏生产,严禁化学石膏添加。它在食品中的应用已经有了几千年的历史,在中国最初的应用就是大家普遍熟悉的点豆腐,随着社会的发展,被实践严格检验的安全、无毒的食品添加剂硫酸钙(食用石膏)在食用工业中的应用越来越广泛。
硫酸钙食品中的用途包括:营养剂,酵母激活剂,面团性质改性剂,固化剂,螯和剂,胶凝剂,发酵粉,载体,填料,pH调节剂,研磨剂。在这些用途中它主要被用在烘焙食品中。作为固化剂它被用在罐装马铃薯、西红柿、胡萝卜、菜豆和胡椒粉中。硫酸钙也被作为一种成分用于糖果蜜饯,冰激凌和其他冷冻的甜品中。硫酸钙也被用在啤酒酿造中,在麦芽处理过程中添加此产品作为增加水中钙离子的含量。硫酸钙在用于与食品接触的清洗剂中被用作研磨剂。硫酸钙也被用在化妆品和牙膏中。
10. 硫酸镁在培养基中的作用是
硫酸镁溶液可以高温高压灭菌
硫酸镁的物理和化学性质稳定,在很多常用的培养基中有都含有,可以直接进行高温高压灭菌。
硫酸镁(Magnesium sulphate)分子量为120.39,分子式为MgSO,用途极为广泛,可用于医药、工业、饲料等领域。硫酸镁通常含有结晶水,即MgSO。·7H,O。硫酸镁溶液(1mol/L,无菌)由硫酸镁、去离子水组成,经高压灭菌处理。