1. 限制酶ecori怎么读
因为不同的限制性内切酶会主动识别不同的切点,不同的切点处在不同的碱基处。所以用两种内切酶会产生两种不同的粘性末端。如果用一种切割会造成两种目的基因粘性末端相同,无法区分开来。再者,限制酶还不能破坏标记基因。
用不同的限制酶切两端,防止载体自连或目的基因自连。
限制性内切酶能识别特定的脱氧核苷酸序列,并于特定位点上准确切割双链dna。可以用它来检测基因变异,检测基因存在与否和位置。限制酶具有专一性,一种限制性内切酶智能识别一种脱氧核苷酸序列。
扩展资料:
限制性内切酶(restriction endonuclease)也称限制性酶(restriction enzyme),是由W. Arber,H. Smith和D. Nathans等人(1979年)从细菌中分离的一类酶。限制酶具有极高的专一性,识别双链DNA上特定的位点,将两条链都切断,形成粘末端或平末端。
限制酶可以用来解剖纤细的DNA分子,在分析染色体结构、制作DNA的限制酶谱、测定较长的DNA序列、基因的分离、基因的体外重组等研究中是不可缺少的工具。对于研究DNA的分子生物学家来说,这是一把天赐神刀——分子生物刀。
2. ecolidna连接酶怎么读
T4DNA连接酶既可以连接黏性末端,也可以连接平末端,而E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端。
但T4DNA连接酶连接平末端效率较低
3. ecori限制酶作用
基因工程操作中涉及一系列相互关联的酶促反应。已经知道有许多重要的核酸酶,如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等,在基因工程的操作中有着广泛的用途。
1.限制性内切核酸酶
限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease)是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并在合适的条件下使每一条链一定位点上的磷酸二酯键断开,产生具有3/—OH基团和5/—P基团的DNA片段的内切脱氧核糖核酸酶(endo-deoxyribonuclease)。至今发现的限制性内切核酸酶有I型酶、Ⅱ型酶和Ⅲ型酶,它们各具特性。基因工程中所说的限制性内切核酸酶都是指Ⅱ型酶。
限制性内切核酸酶把目的基因从只有四种碱基A、T、G、C组成的DNA长链(人类DNA长度为3X109个碱基对)中准确地剪切下来。每一种限制性内切核酸酶的识别位点是固定的,如EcoRI的识别位点是GAATTC及其互补序列CTTAAG。
………………
4. ecori是什么酶
因为限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对在每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。
根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(Type I)、第二型(Type II)及第三型(Type III)。
Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。
扩展资料:
限制性核酸内切酶用途:
1、用于DNA基因组物理图谱的组建;基因的定位和基因分离;DNA分子碱基序列分析;比较相关的DNA分子和遗传工程。
2、限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是提高自身的防御能力.
3、限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA。
影响条件:
DNA纯度、缓冲液、温度条件及限制性内切酶本身都会影响限制性内切酶的活性。大部分限制性内切酶不受RNA或单链DNA的影响。
分布区域:
限制性核酸内切酶分布极广,几乎在所有细菌的属、种中都发现至少一种限制性内切酶,多者在一属中就有几十种,例如在嗜血杆菌属中(Haemophilus)现已发现的就有22种。
有的菌株含酶量极低,很难分离定性;然而在有的菌株中,酶含量极高.如E. coli的pMB4(EcoRI酶)和H. aegyptius(Hal Ⅲ酶)就是高产酶菌株。
据报道从10g的H. aegyptius的细胞中,能分离提纯出可消化l0gλ噬茵体DNA的酶量。到目前为止,细菌是限制性内切酶,尤其是特异性非常强的I类限制性内切酶的主要来源。
5. EcoRI酶怎么读
以菌种名的第一个字母的大写字母起头,以菌种属名的字首二个小写字母继后。
必要时加上菌株的标志字母,如EcoRⅠ的R。最后,若由此菌株可以得到的限制性核酸酶不止一种,则按Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ编号。如:EcoRI,来自大肠杆菌Escherichia coli(Eco),菌株为RY13(R),第1号酶(I)。AluⅠ,来自藤黄节杆菌Arthrobacter luteus(Alu),无特殊菌株,第1号酶。6. 限制酶ecoli
E.coli T4 噬菌体的典型外形是:.蝌蚪形
T4噬菌体是属于大肠杆菌T系噬菌体,为烈性噬菌体。头部为二十面体对称,尾部为螺旋对称,称为蝌蚪形噬菌体。头部大小为80nm×110nm,内部含有双链、线状DNA分子,相对分子质量为1.12 x 108;尾部由尾领、尾鞘、尾髓、尾板、尾刺和尾丝组成,长短为110nm×20nm,尾丝可伸展,幅度可达140nm。
头部外壳含8种蛋白质,呈椭圆形二十面体,尾部含2种蛋白质,呈棒状。T4噬菌体DNA连接酶,最初来自受T4噬菌体侵染的大肠杆菌细胞,T4 DNA连接酶既能连接黏性末端,又能连接平齐末端。
7. smaⅠ限制酶怎么读
酶切法原理:
限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。可分为三类:
Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子,然后从底物上解离。
Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶(限制酶),它切割某一特异的核苷酸序列; 另一种为独立的甲基化酶,其修饰同一识别序列。
Ⅱ类中的限制性内切酶在分子克隆中得到了广泛应用,它们是重组DNA的基础。绝大多数Ⅱ类限制酶识别长度为4至6个核苷酸的回文对称特异核苷酸序列(如EcoRⅠ识别六个核苷酸序列:5'-G↓AATTC-3'),有少数酶识别更长的序列或简并序列。
Ⅱ类酶切割位点在识别序列中,有的在对称轴处切割,产生平末端的DNA片段(如SmaⅠ:5'-CCC↓GGG-3');有的切割位点在对称轴一侧,产生带有单链突出末端的DNA片段称黏性末端,如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的黏性末端。