1. 酶切时间对酶切效果的影响
酶切啊，太熟悉了。 酶切是根据酶切样品的量跟酶切体系中酶的活性来确定的，如果是酶切PCR产物的话，跟你所加的保护碱基数目也是有关的。
一般做酶切的时候加的酶都是过量的，切三四个小时，可以保证获得足够干净的载体，譬如假如你切载体时间太短的话，载体不容易纯化掉，然后就会混入到你的连接产物中影响连接效率，很难挑到构建的克隆，另外酶切时间不宜太长，太长的话会把载体给切碎掉，尤其是有一些有星号活性的酶，切的时间稍微长一载体就会碎掉，影响你的实验结果。
2. 影响酶切效果的因素
Southern blot 是一种常用的 DNA 定量的。其原理是将待测的 DNA 样品固定在固相载体（硝酸纤维膜或尼龙膜）上，与标记的核酸探针进行杂交，在与探针有同源序列的固相 DNA 的位置上显示出杂交信号，通过检测信号的有无、强弱可以对样品定性、定量，从而计算出转入的拷贝数。
Southern 法准确性高、特异性强，但存在费时费力的缺点。
另外，由于 Southern 法检测不经过靶片段的扩增（ PCR ），一般每个电泳通道需要 10-30 μ g 的 DNA ，在实际操作中就需要较大量的植物材料来提取 DNA ，而转基因植物的愈伤组织在无菌条件下经过筛选、重新分化后一般都比较细弱，不宜大量取样。
如果，造成限制性酶切位点丢失， Southern 法也到。这些因素都制约了 Southern 法在 T 0 代转基因植物中。
3. 影响酶切反应的条件
做为具有使用性的载体做为具有使用性的载体，一般最少有2个以上不同的限制性酶切位点，这样能够保证需要插入片段的效率和插入的片段插入的方向性。
如果只有一个酶切位点，那在做连接反应时候载体自连现象会非常严重，同时插入片段有可能以2种相反方向插入载体，这样连接成功后还需要筛选方向正确的连接体，这样筛选过于困难，没有实用性。
4. 影响限制酶酶切效果的因素有哪些
Kpnl单独酶切得到1000by的DNA分子，要推测DNA分子为环状，同时也可知，DNA分子中只有一个Kpnl切割位点．AB选项是链状结构，排除，D中有两个Kpnl切割位点，排除，C只有一个切割位点，且用限制性核酸内切酶Eco RI酶切后得到的DNA分子是200by和800by两种长度的DNA分子，用EcoRⅠ，Kpnl同时酶切后得到200by和400by两种长度的DNA分子，符合题意．故选：C．
5. 影响限制酶酶切效果的主要因素有哪些
区别就是两者词性是不一样，具体的不同如下
restricted中文意思是adj. （大小或数量）有限的，很小的；（指能做的事）有限的，受限制的；受（法规）制约的，受控制的；不对公众开放的；（文件）保密的，限于内部传阅的；（病毒繁殖速率）被限制的；（DNA）因限制酶酶切的
restrains中文意思是v. 制止，阻止；克制，抑制；控制（某事物）；剥夺……的行动自由（或人身自由），管押；（安全带）缚住（人或其身体部位）
6. 酶切时间对酶切效果的影响有哪些
这个你单酶切最好是要过夜，而且跑电泳尽量时间长一些，如果有一条带，就说明差不多完全切开了，如果害怕不安全，可以把这条带切胶回收纯化，用纯化后的连接，自连的可能性会小一些
7. 酶切时间长会有影响吗
酶越多产物浓度越高
酶活力指酶催化反应的能力，活力越高反应越快。但反应速度还与底物和产物的浓度有关，并非仅仅由酶活力决定。至于底物和产物浓度，还与反应时间有关。比如做酶切实验，一开始，酶活力最高，底物浓度也最高，反应速度最快，但产物浓度为零。然后随反应进行，产物积累，底物减少，酶部分失活，总活力下降，反应速度降低。
酶活力是瞬时值，要影响底物和产物浓度，需要时间。
一般情况下，我们认为酶活力是不变的。与底物浓度成正比的，是反应速度。每个酶都以固定速度催化，底物如果很多，所有的酶都在工作，反应就达到最大速度；底物浓度下降，就有一些酶空闲下来，反应速度降低。如果没有补充，底物不断消耗，反应速度就越来越低。所以反应速度与底物浓度成正比。
至于酶活力与底物浓度，如果不补充底物，酶活力越高，底物消耗就越快，底物浓度就越低。
